1 材料與方法

Agilent 1100 高效液相色譜儀( 美國 Agilent 公 司，搭載紫外檢測器) ; Zokia HC-3018Ｒ 高速冷凍離 心機(jī)( 安徽中科中佳科學(xué)儀器公司) ; BP211D 型 1 /10萬電子分析天平( 德國 Sartorius) ; Millicell-CPI 懸掛式培養(yǎng)皿和 Millicell-EＲS DDS-12A 數(shù)字電導(dǎo)儀 ( 美國 Millipore 公司) ; SW-CJ-IF 型超凈臺( 蘇州安 泰空氣技術(shù)有限公司) ; Napco-6100 型細(xì)胞培養(yǎng)箱 ( 美國 Shellab 公司) ; SX-500 TOMY 高壓滅菌鍋( 上 海田源生物技術(shù)有限公司) ; XW-80A 微型旋渦混合 儀( 海門其林貝爾儀器制造有限公司) ; DZE-6050 型真空干燥箱( 上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司) ; SHA-C 水浴恒溫振蕩器( 江蘇金壇億通電子有限公 司) ; Infinite M200Pro 多功能酶標(biāo)儀( 美國 Tecan 公 司) ; TE2000 倒置熒光顯微鏡( 日本 Nikon 公司) ; 超聲波清洗器( 昆山超聲儀器有限公司) 。

2 結(jié)果

Caco-2 細(xì)胞經(jīng) 21～ 24 d 培養(yǎng)，形態(tài)學(xué)上融合形 成連續(xù)、完整的致密細(xì)胞單層，顯微鏡下觀察其 AP 側(cè)覆蓋一層刷狀緣微絨毛，即確認(rèn)其形成單層膜 ，是 Caco-2 細(xì)胞傳代于培養(yǎng)瓶后 1 d 鏡 下觀察結(jié)果，細(xì)胞較稀疏; 是 Caco-2 細(xì)胞傳代 于培養(yǎng)瓶后 4 d 鏡下觀察結(jié)果，細(xì)胞達(dá) 80%以上匯 合，細(xì)胞致密; 是將 Caco-2 細(xì)胞接種于 Transwell 小室中 3 h 鏡下觀察結(jié)果，細(xì)胞呈橢圓狀附著 于聚碳酸脂膜上;  是將 Caco-2 細(xì)胞接種于 Transwell 小室中 21 d 鏡下觀察結(jié)果，細(xì)胞形成致密連 接，細(xì)胞表面覆蓋一層刷狀緣微絨毛。TEEＲ 大于 350 Ω·cm－2，熒光素鈉、普萘洛爾和阿替洛 爾的 Papp 結(jié)果表明 Caco-2 細(xì)胞單層模型構(gòu)建成功。

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